cab’s 胜肽全攻略

其中，使用無拓印胜肽甲殼素複合奈米粒子作為對照組，以計算MQIP以及MRIP的拓印效率(α)。 此實施例中，因為用於拓印甲殼素複合奈米粒子的胜肽濃度分別為0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL以及100 μg/mL，因此後續將其所製得的MQIP或是MRIP簡寫為MQIP(0.1)、MQIP(0.5)、MQIP或是MRIP(0.1)、MRIP(0.5)、MRIP等等，以此類推。 棕榈酰五肽-3主要是通过化学合成胶原蛋白碎片与棕榈酸后得到的一种生物活性多肽，该物质结合了胶原蛋白与棕榈酸的化学性质，添加到化妆品中后，能够有效促进皮肤纤维细胞中的胶原蛋白与氨基葡萄糖的结合，从而紧实肌肤。 同时，棕榈酰五肽-3的应用还能均衡肤色，通过补水与保湿增强皮肤的光泽度与透明感。

柱子在一定PH范围带有特定电荷衍变成一种离子体，而多肽或多肽混合物，由其氨基酸组成表现出相反电荷。 分离是一种电荷相互作用，通过可变PH，离子强度，或两者洗脱出多肽，通常，先用低离子强度的溶液，以后逐渐加强或一步一步加强，直到多肽火柱中洗脱出。 如sulfoethylaspartimide通过酸性pH中带正电来分离。 用酸解法生产的“大豆多肽”，属“食品添加剂”，主要用于老人和儿童食品，其目的是增强这两种人群对食品营养的吸收。 日本所用原料是豆粕，水解方法是酸法，生产的肽酸性化学物质难以除尽，而且有苦味，需用活性炭吸附、脱苦，而活性炭免不了会侵入肽体。 信号肽（Signal cab’s 胜肽 peptide）指的是信号类胜肽，即小分子的蛋白质，在护肤品中，多种结构的信号肽被引入，以达到促进胶原蛋白生成、对抗皮肤氧化等功能。

cab’s 胜肽: 多肽医学领域

於本發明之一實施例中，磁性奈米粒子溶液之製造方法係包含：步驟一，將硫酸亞鐵(FeSO4‧7H2O)、氯化鐵(FeCl3‧6H2O)以及純水混合，以獲得一鐵離子溶液，並將該鐵離子溶液隔水加熱至沸騰；步驟二，於該鐵離子溶液中加入氫氧化鈉以獲得一鐵離子/氫氧化鈉溶液，再以磁力作用於該鐵離子/氫氧化鈉溶液，以獲得一第二沉澱物；以及步驟三：以純水清洗該第二沉澱物，移除純水後再另加入一乾淨的純水，以獲得該磁性奈米粒子溶液。 此實施例中係以100 μg/mL胜肽拓印的甲殼素複合奈米粒子(MQIP或MRIP)，於4℃下，分別針對胜肽Q以及胜肽R進行再吸附實驗，吸附時間為15分鐘，以測試其在不同濃度胜肽溶液中MQIP與MRIP的吸附情形，另使用未拓印胜肽的MNIP作為對照組，以計算拓印效率(α)；所使用的胜肽溶液濃度包含30 μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL、150 μg/mL以及200 μg/mL。 請參見第四圖，於所測試的胜肽濃度範圍內(30~200 μg/mL)，MQIP的再吸附量會隨著胜肽濃度上升而上升；MNIP對於胜肽Q吸附臨界濃度為100 μg/mL，即當胜肽Q溶液濃度高於100 μg/mL時，MNIP對胜肽Q的再吸附量就不會明顯增加。 請再參見第四圖，MRIP於胜肽R溶液濃度低於100 μg/mL時，其吸附量會隨著胜肽R溶液濃度上升而提高，但是於胜肽R溶液濃度高於100 μg/mL時，其吸附曲線會漸趨平緩，表示MRIP的胜肽R吸附臨界濃度為100 μg/mL；而當胜肽溶液濃度高於100 μg/mL之後，所增加的吸附胜肽可能是藉由胜肽與胜肽之間的親和力而達成；又MNIP對於胜肽R的吸附臨界濃度為50 μg/mL，低於MNIP對胜肽Q的吸附臨界濃度，此差異是因甲殼素對於胜肽Q與胜肽R有不同的親和力所導致。 根據第四圖，MQIP與MNIP相比，於胜肽溶液濃度為100 μg/mL所測得的拓印效率(α)為1.86，於胜肽溶液濃度為150 μg/mL所測得的拓印效率(α)為2.3；根據第四圖，MRIP與MNIP相比，於胜肽溶液濃度為100 μg/mL所測得的拓印效率(α)為1.25，於胜肽溶液濃度為150 μg/mL所測得的拓印效率(α)為4.45。 將上述製得的MQIP以及MRIP，分別與50 μg/mL之胜肽Q或是胜肽R作用，於20~30℃進行吸附實驗，吸附時間為2分鐘~3小時，再以高壓液向層析儀(high performance liquid chromatography，HPLC)測量MQIP或是MRIP的再吸附量，以測量MQIP與MRIP對於胜肽Q或是胜肽R的再吸附力。

• 請再參見第一圖，為奈米磁性粒子與各MNIP之粒徑分布曲線圖，不論是奈米磁性粒子或是各MNIP，其粒徑分布皆落於30~120 nm之間。
• 如請求項1所述之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子的製造方法，其中該混合溶液係於0~37℃下作用1~120分鐘。
• 人体血浆中的三肽GHK显示出与Cu2+很强的结合力，它们可以形成复合体铜胜肽（Copper peptide 或GHK-Cu）．
• 血管紧张素转换酶抑制剂：乙酰四胜肽-5和二肽-2被证实是有效的血管紧张素转换酶 （ACE）抑制剂．
• 因為MNIP對於胜肽R的吸附量高於MNIP對胜肽Q的吸附量，顯示甲殼素本身對於胜肽R具有較高的親和力；根據此實驗結果，可知MQIP相比於MRIP具有較佳的胜肽辨識專一性。
• 南瓜中含有人体所需的多种氨基酸，其中赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸等含量较高。
• 棕榈酰六肽+海茴香提取+神经酰胺+A酯，油润的基质，适合比较干燥的皮肤用于眼部抗老，不太讨油皮喜欢的质地。

本發明之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子的製造方法包含步驟一：製備一磁性奈米粒子溶液、一Cas9胜肽溶液與一甲殼素微酸溶液；步驟二：將該磁性奈米粒子溶液、該Cas9胜肽溶液與該甲殼素微酸溶液混合均勻以獲得一混合溶液；步驟三，將該混合溶液於一低溫環境作用10~60分鐘；步驟四：將該混合溶液以磁力作用，以使該混合溶液分層以獲得一澄清液與一第一沉澱物，移除該澄清液並保留該第一沉澱物；以及步驟五：以純水清洗該第一沉澱物至少一次，以獲得該Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子。 本發明Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子製造方法包含：步驟一，製備一磁性奈米粒子溶液，一Cas9胜肽溶液與一甲殼素微酸溶液；步驟二，將磁性奈米粒子溶液、Cas9胜肽溶液與甲殼素微酸溶液混合均勻以獲得一混合溶液；步驟三，將混合溶液作用1~120分鐘；步驟四，將混合溶液以磁力作用，以使混合溶液分層以獲得一澄清液與第一沉澱物，移除澄清液並保留第一沉澱物；以及步驟五，以純水清洗第一沉澱物至少一次，以獲得本案之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子。 本發明係關於一種Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子及其製造方法，製造方法包含：製備一磁性奈米粒子溶液、一Cas9胜肽溶液與一甲殼素微酸溶液；將磁性奈米粒子溶液、Cas9胜肽溶液與甲殼素微酸溶液混合均勻以獲得一混合溶液，並將混合溶液作用1~120分鐘；將混合溶液以磁力作用，以獲得一澄清液與一沉澱物，移除澄清液並保留沉澱物；以純水清洗沉澱物至少一次，以獲得Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子。 cab’s 胜肽 於本案以下的實施例中，係將250 μL之甲殼素微酸溶液與500 μL磁性奈米粒子溶液混合均勻，冰浴且攪拌10分鐘，並將作用溫度維持在0~4℃之間作用2小時；溶液分層之後，再進行後續的清洗步驟。 如請求項1所述之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子的製造方法，其中該磁性奈米粒子溶液之製造方法係包含：步驟一：將硫酸亞鐵(FeSO4‧7H2O)、氯化鐵(FeCl3‧6H2O)以及純水混合，以獲得一鐵離子溶液，並將該鐵離子溶液隔水加熱至沸騰；步驟二：於該鐵離子溶液中加入氫氧化鈉以獲得一鐵離子/氫氧化鈉溶液，再以磁力作用於該鐵離子/氫氧化鈉溶液，以獲得一第二沉澱物；步驟三：以純水清洗該第二沉澱物，移除純水後再另加入一乾淨的純水，以獲得該磁性奈米粒子溶液。

cab’s 胜肽: 多肽合成方法

近几年来，国外厂商已成功解决了乳多肽特有的苦味问题。 将乳多肽加入到婴儿奶粉中可大大提高后者的营养价值并可促进早产儿的生长发育。 玉米一直都被誉为长寿食品， 含有丰富的蛋 白质、 脂肪、 维生素、 cab’s 胜肽 微量元素、 纤维素等， 具有开发高营养、 高生物学功能食品的巨大潜力。 “海鱼皮”是以多种鲨鱼或鳐的皮经加工晒干的成品的统称，过去又称“鲛鱼皮”“鲻皮”等，俗称“鲨鱼皮”，曾用作修饰宝剑的剑把和制作剑鞘 。

伴随人们生活水平的不断提升, 化妆品市场需求也在不断地进步完善, 功能性化妆品也备受推崇。 生物活性多肽类化合物具有高生物活性、易吸收、安全无毒的优势, cab’s 胜肽 其美容护肤、抗衰老的生理作用与生物效应也被逐渐应用到美容化妆品中。 油橄榄叶打头的多种植物提取配合多肽，刺激胶原蛋白生成，维持细胞间网状结构，促进受损皮肤修复，对敏感皮肤比较友好，反馈也是一溜好评。 锁住水分：随着年龄的增长，胶原蛋白的生成减少，这也会导致脱水。

cab’s 胜肽: 多肽活性肽种类

2.高氨基酸类：一般含有氨基酸高的食物含肽量也是比较高的，比如鸡肉、泥鳅、花生、豆类、藻类等。 适合吃含肽高食物的群体：像消化道系统疾病、心脑血管疾病、呼吸系统疾病、内分泌失调的患者、免疫力低下的患者、糖尿病的患者、神经系统疾病的患者等，都是建议食用的，因为肽具有调节免疫力、抗血栓等功效，所以能够帮助到病情的治疗和恢复。 猪蹄中含有丰富的胶原蛋白，这是一种由生物大分子组成的胶类物质，是构成肌腱、韧带及结缔组织中最主要的蛋白质成分，具有美容养颜的作用。 酶法获得多肽，分子量易控制、产品自身富有绿色属性、生产出来的肽无苦味、肽分子量小（分子量大都在1000以下）、这些小分子肽不需消化直接吸收，具有动力、载体、运输、递质和营养功能，特别是它具有活性和多样性即重要的生物学功能。

还有从人体血液中提炼出来的肽 cab’s 胜肽 ，其副作用也很大，它不仅容易使人体染上甲肝、乙肝、丙肝、丁肝、艾滋病毒、性病病毒，而且有排异过敏反应，这种反应一旦出现，生命就危在旦夕。 现阶段所广泛使用到美容护肤、化妆品中的生物活性多肽主要以分子量较小的功能性多肽为主, 且这些多肽大多是采用化学合成法制备得到。 一般肽中含有的氨基酸的数目为二到九，根据肽中氨基酸的数量的不同，肽有多种不同的称呼：分别叫二肽、三肽、四肽、五肽等。 由三个或三个以上氨基酸分子组成的肽叫多肽，它们的分子量低于10,000Da，能透过半透膜，不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。 也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽（小分子肽）；10~50个氨基酸组成的肽称为多肽；由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质，换言之，蛋白质有时也被称为多肽。

cab’s 胜肽: 多肽

由上述之實施說明可知，本案製得之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子內包含了磁性奈米粒子，因此於製備或是純化時皆相當方便；又本案之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子確實能專一辨識Cas9蛋白質並有效吸附Cas9蛋白質。 以下實施例中所使用的Cas9融合蛋白質，係將不具有內切酶活性的突變型Cas9基因，與具有活化轉錄活性的蛋白質基因，以分子生物技術融合後以獲得一質體DNA，再將該質體DNA轉染到細胞中，令細胞表現出Cas9融合蛋白質。 本實施例使用的Cas9融合蛋白質分別為將dCas9與Suntag融合的Cas9-Suntag融合蛋白、將dCas9與P300融合之Cas9-P300融合蛋白，以及將dCas9與VP64-p65-Rta融合之Cas9-VPR融合蛋白；此質體DNA係由中研院購得。 根據第二圖，不論是MQIP或是MRIP，於清洗後的粒徑都比清洗前大，分別多出24~52 cab’s 胜肽 nm與65~180 nm，推測是因為MQIP或MRIP表面拓印的胜肽被純水洗去後會留下胜肽拓印孔洞，因為胺基酸具有不同的親疏水性，疏水性的孔洞會彼此相吸引而團聚，而親水性的拓印孔洞則會分散在水相當中，使MQIP或是MRIP呈現團聚的現象而導致粒徑增加。

其他活性肽包括：胆固醇肽、促进矿物质吸收的肽（CPPS）、酶调节剂（如促胰酶肽）、激素肽如生长激素释放因子（GRFS）、白蛋白胰岛素增效肽、抗菌多肽（如乳酸链球菌素、橡胶素）、抗癌多肽（如肿瘤细胞坏死因子、环已肽）、抗艾滋病肽（如GLQ蛋白）等。 小肽药物除在上述几大方面已取得较大进展外，在其它很多领域也取得一些进展。 比如Stiernberg等发现一个合成肽（TP508）肽能促进伤口血管的再生，加速皮肤深度伤口的愈合。 Pfister等发现一个小肽能防止碱损伤角膜内炎症细胞的侵润，抑制炎症反应。 Carron等证实其筛选的2个合成肽能抑制破骨细胞对骨质的重吸收。

cab’s 胜肽: 多肽生产方法

當以高濃度胜肽進行拓印時，所製得之甲殼素複合奈米粒子的胜肽再吸附效量並沒有持續增加，如表二所示，MQIP、MQIP、MRIP以及MRIP的α值皆小於1，可能是因為以高濃度胜肽進行拓印，過多的胜肽會使甲殼素複合奈米粒子上的拓印孔洞不完整，進而阻礙甲殼素複合奈米粒子再吸附力。 請再參見第一圖，為奈米磁性粒子與各MNIP之粒徑分布曲線圖，不論是奈米磁性粒子或是各MNIP，其粒徑分布皆落於30~120 nm之間。 本發明係關於一種Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子及其製造方法，所製得的Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子能有效辨識並吸附Cas9蛋白質。 Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子及其製造方法 本發明係關於一種Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子及其製造方法，獲得之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子具專一性辨識Cas9蛋白質之功效。 如請求項5所述之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子的製造方法，其中該混合溶液係於0~4℃下作用10~30分鐘。 如請求項1所述之Cas9胜肽拓印甲殼素複合奈米粒子的製造方法，其中該混合溶液係於0~37℃下作用1~120分鐘。